Les composés thyroïdiens inhibent l’oxydation des LDL générée par les macrophages in vitro

Thyroid compounds inhibit in vitro macrophage-induced LDL oxidation

UBPT, UFR Pharmacie, 7 bld Jeanne-d'Arc, 21079 Dijon.

Résumé

De nombreux travaux ont montré que les LDL oxydées ont un rôle proathérogène. Plusieurs types de cellules artérielles sont capables d’oxyder les LDL mais, à un stade précoce de l’athérogenèse, l’oxydation des LDL induite par les macrophages est probablement dominante. Nous avons montré que, parmi les composés thyroïdiens, T₃ et son dérivé acétique TA₃ ont un potentiel antioxydant supérieur à celui de T₄ et de rT₃ sur l’oxydation des LDL induite in vitro par Cu²⁺ (Chomard et al., 1998) ou par un générateur de radicaux libres, l’AAPH (2,2’-azobis-[2-amidino-propane] dichlorhydrate) (Oziol et al., 2001). Ici, nous étudions l’effet de ces composés thyroïdiens sur l’oxydation des LDL induite par des monocytes humains U937 différenciés en macrophages.

Des macrophages sont incubés 24 h avec des LDL à différentes concentrations (0 à 20 μΜ) de T₃, TA₃, T₄, ou rT₃ (expérience 1); d’autres macrophages sont également pré-incubés 24 h avec 1 ou 10 μΜ de ces mêmes composés, lavés, puis incubés 24 h de plus avec des LDL seules (expérience 2). L’oxydation est évaluée par la mesure des TBARS dans le surnageant et la viabilité cellulaire par la mesure de l’activité LDH (EC 1.1.1.27). Dans l’expérience 1, tous les composés diminuent la peroxydation lipidique des LDL, mais T₃ et TA₃ sont moins efficaces que T₄ et rT₃ (IC50: 9,9 et 8,2 contre 1,8 et 1,6 μΜ, respectivement). Dans l’expérience 2, tous les composés inhibent moins l’oxydation des LDL, mais cet effet reste très important pour T₄, important pour TA₃, et faible pour T₃ et rT₃.

La viabilité cellulaire n’est pas affectée par les composés, excepté par TA₃ à forte concentration. Nos données suggèrent que le potentiel antioxydant physico-chimique des composés thyroïdiens est modulé par leur action sur les systèmes redox des macrophages. L’effet cellulaire global de T₃ conduit à une réduction de son potentiel antioxydant, tandis que celui de T₄ l’augmente. Ainsi, T₄ pourrait avoir un effet protecteur sur l’oxydation des LDL induite par les macrophages in vivo.

Abstract

Many data support a proatherogenic role for oxidized LDL. Several arterial cells are able to oxidize LDL but, at early stage of atherogenesis, macrophage- induced LDL oxidation is probably dominant. We have shown that among thyroid compounds, T₃ and its acetic derivative TA₃ have more antioxidant capacity than T₄ and rT₃ on LDL oxidation induced by Cu²⁺ (Chomard et al., 1998) or the free radical generator AAPH (2,2’-azobis-[2-amidinopropane] dihydrochloride) in vitro (Oziol et al., 2001). Here we examined the effect of these compounds on LDL oxidation induced by human monocyte-macrophages U937.

Macrophages were incubated for 24 hr with LDL and different concentrations (0 to 20 μΜ) of T₃, TA₃, T₄ or rT₃ (experiment 1); other cells were also preincubated 24 hr with 1 or 10 μΜ of these same compounds, rinsed out, then incubated for 24 hr more with LDL only (experiment 2). Oxidation was evaluated by supernatant TBARS measurement and cell viability by LDH (EC 1.1.1.27) activity. In the experiment 1, all the compounds decreased LDL lipid peroxidation, but T₃ and TA₃ were less active than T₄ and rT₃ (IC50: 9.2 and 8.2 versus 1.8 and 1.6 μΜ, respectively). Experiment 2 led to a reduced ability of all the compounds to inhibit LDL oxidation, but the effect remained very important for T₄, important for TA₃, and weak for T₃ and rT₃.

Cell viability was not affected by the compounds, except for TA₃ at high concentration. The data suggest that the physico-chemical antioxidant capacity of thyroid compounds is modulated by their action on intracellular redox systems of macrophages. Overall cellular effect of T₃ leads to a reduction of its antioxidant capacity whereas that of T₄ increases it. Thus, T₄ might have a protective effect on macrophage-induced LDL oxidation in vivo.