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Étude d’éléments cis-régulateurs par CRISPR/Cas9. La technologie CRISPR/Cas9 permet d’éditer l’ADN génomique de manière ciblée grâce à un petit fragment d’ARN guide. L’endonucléase Cas9 reconnaît le complexe ARN guide/ADN et coupe le double brin d’ADN, déclenchant ainsi dans la cellule les systèmes de réparation de l’ADN. L’utilisation d’une Cas9 ayant perdu son activité d’endonucléase (dCas9) permet de cibler l’ADN sans le couper. Ainsi, la technologie CRISPR peut être utilisée pour étudier les séquences régulatrices dans leur contexte naturel par délétion d’une séquence régulatrice via l’utilisation de deux ARN guides et réparation de l’ADN par jonction d’extrémités non homologues (I) ou par remplacement d’une séquence par sa copie mutée ajoutée grâce au système de réparation par recombinaison homologue (II), modifications épigénétiques de l’ADN grâce à un modulateur épigénétique (activateur ou répresseur) couplé à la dCas9 (III), identification d’éléments régulateurs potentiels d’un gène d’intérêt en passant au crible les régions génomiques voisines par CRISPR/(d)Cas9 (IV).

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